CICA-INIBIC. Procedimiento para la detección de recombinación homóloga in vivo analizando formas de gfp recombinantes

CICA-INIBIC. Procedimiento para la detección de recombinación homóloga in vivo analizando formas de gfp recombinantes

Descripción del Proyecto

Los grupos de Expresión Génica en Levaduras (Levagen) y de Fisiopatología Endocrina, Nutricional y Médica(FENM), buscan empresas interesadas en la licencia del sistema para la identificación, con microscopio de fluorescencia, de reordenaciones en el genoma (recombinación) originadas por diferentes condiciones. Emplean levaduras que expresan proteínas fluorescentes de diferente localización celular.

Descripción del Área de Actividad / Tecnología

Esta tecnología en el estado actual de desarrollo, permite identificar cambios originados por mutaciones celulares o agentes químicos externos y/o fármacos, que causen reorganizaciones génicas, empleando levaduras como organismo modelo y sin necesidad de hacer ningún tipo de procesado celular. Únicamente la visualización por microscopía de fluorescencia. Una gran ventaja frente a los estudios que aplican técnicas de PCR, es aquí las células se visualizan directamente tras cultivarlas, mientras que el análisis por PCR requiere el procesado de las muestras, la propia PCR y la electroforesis.

Por otro lado con nuestra técnica podemos identificar recombinación en células individuales que podrían pasar desapercibidas, si su frecuencia es baja, en una PCR con el DNA de varias células. En el caso del estudio de recombinación por técnicas de genética clásica, es necesario detectar crecimiento celular en placas selectivas, lo que supone un gasto de tiempo (normalmente2-3 días) y materiales de cultivo.

La tecnología es aplicable y está patentada para su uso en cualquier tipo de célula eucariota. Por tanto en estos casos tampoco es necesario hacer extracciones de ADN ni PCRs y además permite diferenciar el sentido de la recombinación según se pierda la florescencia citosólica o la nucleolar. Incluye dos cepas de levadura para tener un control positivo y otro negativo en los estudios a los que se aplique. La tecnología permite el desarrollo de un software específico de análisis de imagen.